免疫檢驗(yàn)的影響因素及質(zhì)量控制方法論文
1資料與方法
1.1一般資料
從本院2014年4月至2016年4月期間實(shí)施臨床免疫檢驗(yàn)資料中，抽取3600份資料納入到研討范圍中，作為研究對(duì)象。主要檢測(cè)項(xiàng)目是乙肝五項(xiàng)，HBSAg（乙肝表面抗原）、抗-HBS（乙肝表面抗體）、HBeAg（e抗原）、抗-HBe（e抗體）、抗-HBc（核心抗體）[3]。
1.2方法
采集血清樣本，對(duì)樣本進(jìn)行血清測(cè)試，采用全自動(dòng)生化檢測(cè)儀器，進(jìn)行檢測(cè)時(shí)應(yīng)全程嚴(yán)格依照規(guī)范化流程進(jìn)行。對(duì)于免疫檢驗(yàn)標(biāo)本必須抽取受檢者的晨起空腹靜脈血，對(duì)血液中乙肝病毒進(jìn)行檢測(cè)，分辨其血清學(xué)標(biāo)志[4]。
1.3分析影響因素
檢驗(yàn)過(guò)程中，經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)影響免疫檢驗(yàn)結(jié)果，主要因素有：檢驗(yàn)標(biāo)本。血清標(biāo)本是導(dǎo)致免疫檢查結(jié)果出現(xiàn)偏差的基本原因，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行采集和收藏時(shí)，都會(huì)受到一些不利因素影響，例如在采集時(shí)，交叉反應(yīng)物、補(bǔ)體等均會(huì)影響標(biāo)本，明顯增加了假陽(yáng)性率，因此免疫檢驗(yàn)結(jié)果也受到影響。另外，在保存和收藏標(biāo)本時(shí)，受環(huán)境、光照、濕度和溫度等因素的影響，均會(huì)造成標(biāo)本成分出現(xiàn)直接性變異，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量受到影響。儀器設(shè)備。檢驗(yàn)設(shè)備會(huì)直接影響到檢測(cè)質(zhì)量，在免疫檢驗(yàn)時(shí)，需要提前檢查設(shè)備，檢測(cè)試劑是否有效合理，若檢測(cè)試劑或設(shè)備的性能不好，將會(huì)帶來(lái)不利的影響，為此，需要加強(qiáng)對(duì)儀器設(shè)備方面的控制。操作技術(shù)。操作人員的技術(shù)是主觀影響因素，免疫檢驗(yàn)人員的個(gè)人差異會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成一定影響，例如個(gè)人技術(shù)水平、標(biāo)本的標(biāo)記、操作的規(guī)范化、掌握操作技能的程度等均會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果。因此，需要多加培訓(xùn)操作人員，提高技術(shù)水平，才能保障檢驗(yàn)工作的正常進(jìn)行。
2結(jié)果
將3600份免疫檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，影響檢疫檢驗(yàn)結(jié)果主要因素是檢驗(yàn)人員技術(shù)、儀器設(shè)備、標(biāo)本。共136份資料出現(xiàn)異常，誤差率為3.78%（136/3600），其中31份為標(biāo)本污染變異造成、38份為儀器使用不當(dāng)造成、25份為試劑失效造成、42份為操作人員操作失誤造成。為了降低免疫檢驗(yàn)結(jié)果的誤差情況，需要對(duì)影響因素加以控制，才能提高質(zhì)量控制。
3討論
免疫檢查主要包括抗原抗體反應(yīng)、放射免疫、酶免疫等，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[5-8]將直接影響到臨床醫(yī)師對(duì)疾病的判斷及對(duì)治療措施的選擇，甚至影響其治療效果。為此，必須確保免疫檢查的準(zhǔn)確性。免疫檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)受到各種因素的影響，主要包括對(duì)樣本的采集、收藏、轉(zhuǎn)移、保存、檢驗(yàn)等均會(huì)受到各種外源性和內(nèi)源性的因素影響[8-11]，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)錯(cuò)誤或誤差。為此，必須了解影響免疫檢驗(yàn)結(jié)果的因素，并加強(qiáng)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量控制。對(duì)于樣本，加強(qiáng)采集與保存。對(duì)樣本進(jìn)行采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照激素類(lèi)血清樣本的標(biāo)準(zhǔn)采集方式進(jìn)行，一般采集晨起靜脈血液，妥善保存標(biāo)本，防止變性[11-13]。加強(qiáng)對(duì)儀器和試劑的保養(yǎng)和檢查，定期維護(hù)設(shè)備，使用前需要測(cè)試。定期培訓(xùn)考核檢驗(yàn)人員，使其工作技能得到提高，確保其結(jié)果的準(zhǔn)確性[14-15]。檢驗(yàn)結(jié)束后，詳細(xì)記錄檢驗(yàn)資料、填寫(xiě)報(bào)告單、反復(fù)清洗儀器等，做好交接工作，并復(fù)查免疫檢驗(yàn)結(jié)果。此次將3600份免疫檢驗(yàn)資料納入到研討范圍中，詳細(xì)分析檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的誤差，尋找質(zhì)量控制方法，確保標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化、試劑及設(shè)備的有效使用，加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的培訓(xùn)及技術(shù)規(guī)范化。經(jīng)分析影響這些有效的質(zhì)量控制對(duì)策因素后得知，要想有準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，必須在檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)用規(guī)范合理化的操作流程。免疫檢驗(yàn)，主要是將高靈敏度和高特異性的免疫反應(yīng)二者加以結(jié)合，從而達(dá)到免疫檢驗(yàn)的良好效果。主要用于一些抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素以及藥物相關(guān)的檢測(cè)分析技術(shù)。在臨床上被廣泛接受和使用，主要是因其具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、試劑穩(wěn)定且有效期長(zhǎng)、方法穩(wěn)定快速、檢測(cè)范圍寬、操作簡(jiǎn)單、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。
在臨床操作的工作中，免疫檢驗(yàn)主要受以下三個(gè)方面的影響：
�。�1）標(biāo)本。要特別注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血的情況。一般來(lái)說(shuō)，血紅蛋白中含有血紅素基因，其中具有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP作為標(biāo)記酶的化學(xué)發(fā)光測(cè)定中，如果出現(xiàn)了血清的標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高的情況，就很容易在以后的檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)固相的情況，從而使得HRP的反應(yīng)值相應(yīng)偏高，造成假陽(yáng)性的結(jié)果。在樣本的.采集以及血清分離的工作中，一定要盡量避免遭受到細(xì)菌的污染。一方面，由于細(xì)菌的生長(zhǎng)而分泌的一些酶有可能會(huì)對(duì)抗原體等蛋白產(chǎn)生一定的分解作用，從而影響檢驗(yàn)效果。另一方面，細(xì)菌的內(nèi)部性酶，如大腸桿菌之類(lèi)的，會(huì)對(duì)后續(xù)的檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生一定的誤導(dǎo)，因?yàn)樗赡軙?huì)干擾以酶為標(biāo)記物的檢驗(yàn)方式。因此，新鮮標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果更加能夠準(zhǔn)確地反映出機(jī)體的真實(shí)情況。所以，真正行之有效的免疫檢驗(yàn)應(yīng)在采血后的24小時(shí)以?xún)?nèi)完成，以此來(lái)保證檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性。尤其需要注意的一點(diǎn)是，在血液標(biāo)本采集以后，必須使其充分凝固以后再進(jìn)行血清的分離。如果血液還未開(kāi)始凝固就開(kāi)始進(jìn)行血清分離，容易使血清中殘留部分纖維蛋白，從而造成假陽(yáng)性的結(jié)果。如果在24小時(shí)之內(nèi)不能完成檢測(cè)，那么應(yīng)該將血清分離之后，妥善保存于-20℃的冰箱里備檢，并且做好相關(guān)的原始記錄，如待檢者的姓名、日期、檢查項(xiàng)目等，并且反復(fù)進(jìn)行凍融。
�。�2）試劑。免疫檢驗(yàn)需要大量相關(guān)的試劑，而不同廠家生產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在著一定的差別，如果使用劣質(zhì)的試劑，勢(shì)必會(huì)造成假陽(yáng)性或者假陰性的結(jié)果，從而影響免疫檢驗(yàn)的有效性和準(zhǔn)確性。因此，選用高質(zhì)量的試劑對(duì)于免疫檢驗(yàn)成功與否具有重要意義。在進(jìn)行檢驗(yàn)之前，先將試劑從冰箱中取出，待其與室溫平衡1小時(shí)以后方可使用。如果試劑已開(kāi)封，就應(yīng)該妥善使用和保管，每次使用后應(yīng)將其放回2-8℃的冰箱內(nèi)保存，試劑開(kāi)封后盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。不同批次和批號(hào)的試劑不能重復(fù)混用，以免引起混亂，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤。
（3）操作技術(shù)。操作技術(shù)直接與免疫檢驗(yàn)的結(jié)果相關(guān)，如操作不當(dāng)將直接導(dǎo)致檢驗(yàn)出錯(cuò)。比如，吸量不準(zhǔn)確就容易導(dǎo)致測(cè)定的差異，從而直接影響檢測(cè)結(jié)果，因此加樣器應(yīng)該及時(shí)清洗并且定期校準(zhǔn)。應(yīng)該避免加錯(cuò)樣本以及加樣過(guò)快，因?yàn)榧訕舆^(guò)快容易造成儀器的污染，從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。加樣本以及試劑之時(shí)應(yīng)避免加在孔壁上，造成重復(fù)性差異。
�。�4）溫度。如果弱陽(yáng)性的樣本檢測(cè)不出來(lái)，或由于溫度不夠等原因造成。應(yīng)盡量減少受熱不均等情況出現(xiàn)，并且貼密封膜，防止污染物的浸入，以免影響免疫檢驗(yàn)。
�。�5）洗板。用來(lái)檢驗(yàn)以及備用的蒸餾水一定要合格，量筒一定要保持干凈清潔。如果洗板不干凈，或者儀器的針孔堵塞，都容易造成假陽(yáng)性；實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)該保持在25℃左右，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該加裝空調(diào)，以此來(lái)確保室內(nèi)溫度在不同的季節(jié)保持穩(wěn)定，使之對(duì)免疫檢驗(yàn)的影響最小。
�。�6）發(fā)光值。在一切準(zhǔn)備就緒后，待等量的發(fā)光液混合均勻，避免漏加情況的出現(xiàn)。如果發(fā)光液變質(zhì)，可能會(huì)造成假陰性；如果發(fā)光液發(fā)光時(shí)間不足，可能會(huì)造成假陰性，從而影響免疫檢驗(yàn)的結(jié)果�？偠灾瑱z驗(yàn)工作中的免疫檢驗(yàn)會(huì)受到許多因素的影響，從而造成檢驗(yàn)質(zhì)量不達(dá)標(biāo)。為此，臨床中應(yīng)當(dāng)做好監(jiān)督與管理，著重控制影響因素，才能提高免疫檢驗(yàn)質(zhì)量。
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