分析D3形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎囊胚形成的影響因素論文

　　隨著序貫培養(yǎng)系統(tǒng)的不斷完善，形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎的利用價(jià)值日益受到關(guān)注。已有報(bào)道形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎經(jīng)體外繼續(xù)培養(yǎng)仍有一部分能發(fā)育成囊胚，且移植這些由取卵后第3天(D3)形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎培養(yǎng)而來(lái)的囊胚最終獲得妊娠，并且可以利用這類(lèi)形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎建立人類(lèi)胚胎干細(xì)胞(human embryonic stem cell)系用于研究。已有很多文獻(xiàn)報(bào)道了胚胎形態(tài)與低評(píng)分胚胎囊胚形成的關(guān)系，但對(duì)形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎囊胚形成的相關(guān)臨床因素卻很少涉及，本研究通過(guò)對(duì)影響低評(píng)分胚胎囊胚形成的相關(guān)臨床因素及胚胎因素進(jìn)行分析，為如何挑選低評(píng)分胚胎繼續(xù)培養(yǎng)以及提高囊胚形成率及質(zhì)量提供理論支持和數(shù)據(jù)參考。

　　1 對(duì)象與方法

　　1.1 研究對(duì)象

　　收集2012年4月—2012年12月在本生殖中心行常規(guī)體外受精/胞漿內(nèi)單精子注射-胚胎移植(IVF/ICSIET)治療且滿足以下納入標(biāo)準(zhǔn)的所有患者：①第1個(gè)IVF/ICSI-ET治療周期。②采用黃體中期降調(diào)的長(zhǎng)方案。③新鮮周期移植2個(gè)或3個(gè)優(yōu)質(zhì)胚胎后還有剩余的低評(píng)分胚胎行囊胚培養(yǎng)，移植優(yōu)質(zhì)胚胎后若還有剩余的優(yōu)質(zhì)胚胎則進(jìn)行玻璃化快速冷凍保存。經(jīng)患者知情同意后將低評(píng)分胚胎移入囊胚培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)觀察，記錄囊胚發(fā)育情況，有囊胚形成者根據(jù)囊胚質(zhì)量選擇凍存或丟棄。422個(gè)周期共有1 745個(gè)低評(píng)分胚胎進(jìn)行了繼續(xù)囊胚培養(yǎng)。

　　1.2 實(shí)驗(yàn)方法

　　1.2.1 胚胎培養(yǎng)及評(píng)估

　　按Peter卵裂期胚胎評(píng)分系統(tǒng)評(píng)估D3胚胎質(zhì)量[4]。Ⅰ級(jí)：卵裂球大小一致，胞質(zhì)均勻，細(xì)胞碎片<10%;Ⅱ級(jí)：卵裂球大小一致，胞質(zhì)均勻，10%≤細(xì)胞碎片≤20%;Ⅲ級(jí)：卵裂球大小不一致，胞質(zhì)不均勻，細(xì)胞碎片<10%;Ⅳ級(jí)：卵裂球大小不一致、胞質(zhì)均勻，20%<細(xì)胞碎片≤40%，或卵裂球大小不一致，胞質(zhì)不均勻，10%≤細(xì)胞碎片≤20%;ⅴ級(jí)：細(xì)胞碎片>40%;Ⅵ級(jí)：全碎片。D3有7～8個(gè)細(xì)胞數(shù)的Ⅰ、Ⅱ級(jí)胚胎為優(yōu)質(zhì)胚胎，其余D3胚胎為形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎。

　　1.2.2 囊胚培養(yǎng)及評(píng)分

　　將低評(píng)分胚胎移至預(yù)先平衡好的G2培養(yǎng)液微滴中培養(yǎng)至5～7 d，觀察胚胎發(fā)育情況，根據(jù)Gardner囊胚評(píng)分系統(tǒng)[5]對(duì)囊胚進(jìn)行評(píng)分，將D5和D6評(píng)分≥3BB囊胚定為優(yōu)質(zhì)囊胚。

　　1.2.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

　　主要觀察指標(biāo)：觀察囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率。

　　1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果以百分率表示，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05;組內(nèi)兩兩比較按照χ2分割法，則分3組中的`兩兩比較的檢驗(yàn)水平為0.0125。

　　2 結(jié)果

　　2.1 囊胚形成情況

　　本研究共收集422個(gè)取卵周期1 745個(gè)低評(píng)分胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)，共形成囊胚1 046個(gè)，囊胚形成率為59.9%，其中優(yōu)質(zhì)囊胚為763個(gè)，優(yōu)質(zhì)囊胚形成率為43.7%。

　　2.2 年齡、基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)及基礎(chǔ)卵泡刺激素(bFSH)與囊胚形成的關(guān)系

　　年齡≤35歲組的優(yōu)質(zhì)囊胚形成率高于年齡>35歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而2組的囊胚形成率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)�；颊呋�礎(chǔ)竇卵泡數(shù)、bFSH各自組間的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

　　2.3 促性腺激素(Gn)總劑量、人絨毛膜促性腺激素(hCG)日雌二醇(E2)水平、獲卵數(shù)與囊胚形成的關(guān)系

　　隨著Gn總劑量的增大，囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率逐漸降低，但組間囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)hCG日E2水平將患者分3組，3組間的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。獲卵11～20個(gè)組的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率最高，獲卵≤10個(gè)組的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率最低，但各組間囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

　　2.4 D3卵裂細(xì)胞數(shù)、胚胎碎片與囊胚形成的關(guān)系

　　D3卵裂細(xì)胞球數(shù)為4～6個(gè)組的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成均最低，與卵裂細(xì)胞數(shù)為7～9個(gè)、10～14個(gè)組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.012 p="">0.012 5)。D3胚胎碎片≤10%組的囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率高于碎片為20%～25%組，≤10%組優(yōu)質(zhì)囊胚形成率高于10%<碎片<20%組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.012 p="">0.012 5)。

　　3 討論

　　囊胚的形成受多種因素的影響，單獨(dú)依據(jù)形態(tài)學(xué)評(píng)分來(lái)衡量囊胚的形成情況有一定局限性，所以在挑選低評(píng)分胚胎進(jìn)行囊胚培養(yǎng)時(shí)，對(duì)囊胚形成的影響因素應(yīng)該了解。探討低評(píng)分胚胎囊胚形成的影響因素可為優(yōu)質(zhì)胚胎行囊胚培養(yǎng)提供一些理論依據(jù)及參考價(jià)值，從而提高囊胚形成率及質(zhì)量，使更多的患者可選擇單優(yōu)質(zhì)囊胚移植，提高妊娠率的同時(shí)又減少多胎率，且可利用低評(píng)分胚胎形成囊胚建立胚胎干細(xì)胞系用于科研，為胚胎干細(xì)胞提供更多的資源。另外低評(píng)分胚胎囊胚形成情況監(jiān)測(cè)可作為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的一個(gè)常規(guī)項(xiàng)目，其對(duì)人類(lèi)胚胎體外培養(yǎng)系統(tǒng)穩(wěn)定性的衡量更為直接和準(zhǔn)確。

　　3.1 年齡、基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)、bFSH與囊胚形成的關(guān)系

　　眾所周知年齡、基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)、bFSH對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能的預(yù)測(cè)有重要意義，但有關(guān)年齡、基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)、bFSH對(duì)低評(píng)分胚胎囊胚形成的影響卻鮮有報(bào)道。有研究發(fā)現(xiàn)，隨女性年齡增大，胚胎染色體異常發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增高，特別是年齡>35歲時(shí)尤為明顯[7]。另有研究顯示，女性年齡的增長(zhǎng)對(duì)囊胚擴(kuò)張及孵化程度及滋養(yǎng)外胚層(TE)質(zhì)量有負(fù)面影響[8]。本研究顯示≤35歲組與>35歲組相比囊胚形成率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但優(yōu)質(zhì)囊胚形成率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示年齡影響囊胚質(zhì)量。本研究還顯示基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)、bFSH對(duì)囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率沒(méi)有明顯影響，可能基礎(chǔ)竇卵泡數(shù)及bFSH只與儲(chǔ)備功能有關(guān)，影響獲卵數(shù)及形成胚胎數(shù)，但不影響囊胚及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率。

　　3.2 Gn總劑量、hCG日E2、獲卵數(shù)與囊胚形成的關(guān)系

　　有研究顯示溫和的卵巢刺激可以減少早期卵裂的錯(cuò)誤，可以得到更多的優(yōu)質(zhì)胚胎移植。同時(shí)有研究提示Gn總劑量水平與囊胚質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)。Thomas等研究顯示優(yōu)質(zhì)囊胚的形成與Gn用量成反比，本研究結(jié)果與此結(jié)果相似，發(fā)現(xiàn)隨著Gn用量的增加，囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率有降低趨勢(shì)，但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是本研究中囊胚只來(lái)源于低評(píng)分胚胎及樣本量不足的原因所致。Thomas等研究提示囊胚形成與促排卵第8天E2水平無(wú)關(guān)，與本研究結(jié)果相似。還有研究顯示獲卵數(shù)與TE質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，但本研究結(jié)果提示囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率在獲卵數(shù)≤10個(gè)、11～20個(gè)、>20個(gè)的組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　3.3 D3卵裂細(xì)胞數(shù)、胚胎碎片與囊胚形成的關(guān)系

　　大量的研究表明胚胎卵裂的快慢影響囊胚的形成。Wang等的研究顯示7～9細(xì)胞組的胚胎囊胚形成率高于細(xì)胞≤6細(xì)胞組的囊胚形成率(P<0.05)，但與≥10細(xì)胞組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。溫烯等的研究報(bào)道細(xì)胞數(shù)<8個(gè)時(shí)，隨著細(xì)胞數(shù)增加，囊胚形成率有升高趨勢(shì)，當(dāng)細(xì)胞數(shù)>8個(gè)時(shí)囊胚形成率不再升高。但Racowsky等[13]發(fā)現(xiàn)卵裂速度較快及中等的胚胎其囊胚形成率顯著高于卵裂速度緩慢的胚胎，且D3胚胎卵裂細(xì)胞數(shù)越多，胚胎發(fā)育速度越快，則其優(yōu)質(zhì)囊胚形成率就越高。本研究結(jié)果為臨床囊胚培養(yǎng)提供參考：卵裂細(xì)胞數(shù)≥7個(gè)組的低評(píng)分胚胎囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率均高于卵裂細(xì)胞數(shù)為4～6個(gè)組，隨著卵裂細(xì)胞數(shù)的增加，其囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率亦增加，但7～9個(gè)組與≥10個(gè)組相似。胚胎碎片會(huì)影響細(xì)胞之間的連接，干擾細(xì)胞的融合、囊腔和囊胚的形成;隨著胚胎碎片的增多，囊胚形成率降低，囊胚的細(xì)胞數(shù)目尤其是TE數(shù)目減少。

　　本研究結(jié)果顯示，碎片≤10%的胚胎優(yōu)質(zhì)囊胚形成率高于碎片>10%的胚胎，10%<碎片<20%的胚胎與20%～25%的胚胎囊胚形成率及優(yōu)質(zhì)囊胚形成率相似。

　　綜上所述，低形態(tài)學(xué)評(píng)分胚胎有繼續(xù)發(fā)育潛能及繼續(xù)發(fā)育的能力。很少有文獻(xiàn)涉及臨床因素對(duì)低評(píng)分胚胎囊胚形成率的影響，本研究顯示D3卵裂細(xì)胞數(shù)、D3胚胎碎片顯著影響低評(píng)分胚胎的囊胚形成，其中年齡、D3卵裂細(xì)胞數(shù)、D3胚胎碎片影響低評(píng)分胚胎的優(yōu)質(zhì)囊胚形成。

【分析D3形態(tài)學(xué)低評(píng)分胚胎囊胚形成的影響因素論文】相關(guān)文章：

醫(yī)師醫(yī)療責(zé)任保險(xiǎn)購(gòu)買(mǎi)意愿的影響因素調(diào)查分析論文08-09

HR職業(yè)瓶頸的形成因素11-03

影響員工培訓(xùn)積極性因素及對(duì)策分析05-21

影響面試成績(jī)的因素02-22

形成HR職業(yè)瓶頸的主要因素10-23

大學(xué)英語(yǔ)四級(jí)考試成績(jī)影響因素的分析及思考教育論文01-03

淺析社會(huì)因素對(duì)女性語(yǔ)言的影響論文開(kāi)題報(bào)告范本10-06

影響?zhàn)B老金水平的因素10-24

新西蘭留學(xué)獎(jiǎng)學(xué)金申請(qǐng)的影響因素09-10

影響員工歸屬感因素05-16